A hagyomány szerint Túri Szabó Lukács és Túri Sánta Jakab Wittenbergben tanult diákok alapították az iskolát, majd „haláluk után mindjárt egész collegium fundáltatott.” A nagy reformátor, Szegedi Kis István 1551-től 1553-ig munkálkodott Mezőtúron mint a református egyház prédikátora és a református gimnázium első rektora.
A századok folyamán neves tanárok sora oktatott Mezőtúron: Kolosvári Aladár irodalmár, Szelényi Ödön irodalomtörténész, Benkő Gyula természettudós, Csenki Imre Kossuth-díjas karnagy, népdalgyűjtő, Rédei László matematikus, Kossuth-díjas, Félegyházy Gyula festő, akik kiváló tanítványok hosszú sorát adták a hazának. Itt tanult Kocsi Sebestyén István lelkipásztor, egyházi író, Szép Ernő költő, Tamkó Sirató Károly költő, Erdélyi József költő, Kiss Ferenc esperes, egyetemi tanár, két Kálvineum alapítója, Várkonyi Zoltán színész, Kossuth-díjas filmrendező, Kner Imre nyomdász, tipográfus, könyvkiadó, Zsigmond Ferenc irodalomtörténész, akadémikus, Gorka Géza Kossuth-díjas keramikus, Papp Bertalan kardvívó olimpiai bajnok, Sántha Lajos huszonhatszoros magyar bajnok férfi tornász.